脑卒中是造成残疾的主要原因,严重威胁人类的生命,大脑中动脉(MCA)阻塞是脑卒中综合征重要原因。通常利用闭塞MCA60分钟再灌注方法建立大鼠脑卒中动物模型来模拟这种临床综合征。
下面是来自JOVE的关于大鼠大脑中动脉闭塞的手术视频:
操作要点:
将自发性高血压大鼠(或其他选择的大鼠品系)放入麻醉诱导室使用5%异氟烷剂量麻醉,使用低于1-2%异氟醚维持麻醉。
将眼膏涂在双眼上保护眼睛。
剔除将喉部和左颈部区域的毛发,并消*。
在切口部位皮下注射0.2mL的0.5%普鲁卡因麻醉。
在手术显微镜下,进行颈正中切口,解剖浅筋膜。
在浅筋膜下方,颈部左侧有腺体组织,形成三角形区域的三块肌肉:位于中线气管上方的胸骨舌骨肌;二腹肌(易于识别其有光泽的白色肌腱部分);最后面是胸锁乳突肌。
在三角形区域内小心地进行锐性和钝性解剖分离并鉴别颈动脉(钝性分离,将意外的组织损伤降至最低)。暴露外侧,内测和颈总动脉(ECA,ICA,CCA)。颈总动脉很大,可以看见脉冲。同时可见迷走神经沿颈总动脉和颈内动脉外侧方向行走,将迷走神经从颈总动脉和颈内动脉上清除。
将外侧颈动脉ECA的分支,第一支向内侧,第二支向外侧。结扎切断,留下颈外侧动脉。竟可能暴露远端颈动脉,用6#缝合线定位。
类似方法尽可能暴露ICA,用6#缝合线定位。
将血管夹放置在颈总动脉和颈内动脉处附近的分叉处,阻断血流。
将缝合线打结,并将部分分支动脉切断。
将2.2-3.0厘米长的4-0#缝合线末端硅涂层2.0厘米,做成圆形尖端缝合线,慢慢插入ECA管腔,并朝向方向插到血管夹所在的CCA。
拧合ECA残端周围的丝线,固定管腔内的缝合线并防止出血,然后取出来ICA的微血管夹。
继续将缝合线从ECA推进到ICA腔到达大脑中动脉(MCA)。这个长度通常是1.8-2厘米,如果初始推进过程中感觉到阻力,缝合线可能进入翼腭动脉,可向后拉并稍微弯曲缝线,继续沿着ICA推进,继续插入尼龙缝线在2厘米处感到阻力时。说明已经阻断了MCA。
移除CCA下端的血管夹。
启动计时器并记录闭塞开始时间。
用3-0丝线缝合关闭切口(真皮,肉膜,皮下组织层),并小心将鼠置于回收笼中。
在闭塞期结束后,重新麻醉大鼠进行MCA血流再灌注,重新打开切口。
像之前一样在CCA上放一个血管夹。
从ICA中抽出阻塞的缝合线,直到可以看到缝合线末端。不要完全从ICA/ECA上取下缝合线!
在ICA管腔缝合线末端的上方放置一个血管夹。
再完全去除阻塞的缝线,并将ECA残端结扎。记录闭塞结束(再灌注开始)时间。
从ICA上取下血管夹。
从CCA上取下血管夹。
使用3-0缝合线关闭切口。
大鼠麻醉恢复后,可通过抓住大鼠观察大鼠是否可以转向两边,简单测试脑梗塞的行为学指征,,如果只会转向一边则说明大鼠脑卒中模型建立成功。
大脑中动脉阻塞的位置
脑卒中1小时脑片图片
参考文献
Ulu?,K.,Miranpuri,A.,Kujoth,G.C.,Aktüre,E.,Ba?kaya,M.K.FocalCerebralIschemiaModelbyEndovascularSutureOcclusionoftheMiddleCerebralArteryintheRat.J.Vis.Exp.(48),e,doi:10./().
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